LAWSON08-III非接觸式超聲波粉碎機(jī)，也叫杯式破碎，用于無(wú)菌破碎，隔著離心管能打斷染色體、破碎細(xì)胞。適于ChP、ChP-seq、RNA-seq以及染色質(zhì)剪切 和DNA剪切(用于二代測(cè)序)。專(zhuān)為二代測(cè)序DNA樣本與染色質(zhì)免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)樣本前處理量身訂做，相比傳統(tǒng)的探頭接觸式超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)，非接觸式樣品可在密封容器下進(jìn)行破碎，不產(chǎn)生感染性飛霧，超聲波探頭與樣品不接觸，避免交叉污染。非接觸式超聲波粉碎機(jī)可獲得傳統(tǒng)超聲方式無(wú)可比擬的質(zhì)量、效率和安全性。

一次可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品，實(shí)驗(yàn)效率高；無(wú)磨損，掉渣現(xiàn)象，各樣品均在單獨(dú)的全封閉試管中，避免交叉污染；可選配冷卻水循環(huán)系統(tǒng)，便于樣品在4℃水浴超聲波，能量分布均勻，超聲作用完全；超聲參數(shù)設(shè)置靈活，實(shí)驗(yàn)步驟標(biāo)準(zhǔn)化，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好，結(jié)果可靠性高。

逐漸成為ChIP(染色質(zhì)免疫共沉淀)和DNA剪切研究平臺(tái)不可缺少的標(biāo)準(zhǔn)化工具。實(shí)驗(yàn)效率高、結(jié)果可靠、重復(fù)性佳，最低可處理5ul的樣本，適用珍貴的樣本。

非接觸式超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)工作原理：

    非接觸式超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)（超聲波細(xì)胞粉碎儀）采用在水槽底部安裝超聲波發(fā)生裝置的設(shè)計(jì)，傳統(tǒng)的探頭超聲波破碎儀，超聲波引起的微流動(dòng)現(xiàn)象只能在靠近探頭的區(qū)域出現(xiàn)，而非接觸式超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)由于在水槽底部安裝了超聲波發(fā)生器，使水槽完全處于超聲波的作用范圍內(nèi)，超聲作用分布廣泛而平衡，降低了泡沫的形成。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，非接觸式超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)自動(dòng)的連續(xù)旋轉(zhuǎn)離心管則使超聲波的能力分布更為均勻。非接觸式超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)在實(shí)驗(yàn)過(guò)程仲，樣品分別置于獨(dú)立的全密封離心管中，樣本之間不存在任何交叉污染，避免了氣霧的傳播。

非接觸式超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)優(yōu)越性：

   傳統(tǒng)的探頭超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)，探頭與樣品直接接觸，有金屬離子污染，一次只能處理一個(gè)樣品，實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)；對(duì)于多個(gè)樣品，需要重復(fù)使用同一探頭，容易造成樣品交叉污染。由于每次探頭插入樣品的深度不用，每次超聲的能量分布也不盡相同，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重復(fù)性和準(zhǔn)確性。此外由于不能采用封閉系統(tǒng)，在超聲過(guò)程中產(chǎn)生的氣霧或者泡沫會(huì)擴(kuò)散到環(huán)境中，造成潛在的生物危險(xiǎn)。非接觸式超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)，一次可同時(shí)檢測(cè)4-32個(gè)樣品，實(shí)驗(yàn)效率高；無(wú)需頻繁操作探頭，各樣品均在單獨(dú)的全封閉試管中，避免交叉污染；采用4度水浴，超聲波能量分布均勻，超聲作用完全；超聲參數(shù)設(shè)置靈活，實(shí)驗(yàn)步驟標(biāo)準(zhǔn)化，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好，結(jié)果可靠性高。

⒈無(wú)氣霧浮質(zhì)產(chǎn)生—增強(qiáng)生物安全性（如分支桿菌、病毒等）

⒉消除了樣品交叉污染的危險(xiǎn)

⒊消除了傳統(tǒng)的探頭磨損掉渣現(xiàn)象

⒋可處理多種樣品，樣品處理范圍廣泛

⒌適用于各種標(biāo)準(zhǔn)容器

⒍可用于處理微量樣品，最小到5ul

⒎自動(dòng)的連續(xù)旋轉(zhuǎn)離心管則使超聲波的能量分布更為均勻

⒏可選配高低溫恒溫水浴槽、按照客戶需求定制各種直徑的Eppendorf管破碎旋轉(zhuǎn)基座

應(yīng)用范圍：

⒈DNA片段化

⒉RNA片段化

⒊細(xì)菌和細(xì)胞破碎

⒋ChIp assay（染色質(zhì)免疫共沉淀）

⒌高通量測(cè)序儀樣本前處理

⒍取膜蛋白

⒎均質(zhì)，乳化反應(yīng)

⒏貴重試劑的超聲處理

2018新款非接觸式超聲波破碎儀LAWSON08-II產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)：

封閉系統(tǒng)，在超聲過(guò)程中產(chǎn)生的氣霧或者泡沫會(huì)擴(kuò)散到環(huán)境中，造成潛在的生物危險(xiǎn)。非接觸式全自動(dòng)超聲破碎儀，一次可同時(shí)檢測(cè)4-32個(gè)樣品，實(shí)驗(yàn)效率高；無(wú)需頻繁操作探頭，各樣品均在單獨(dú)的全封閉試管中，避免交叉污染；超聲波能量分布均勻，超聲作用完全；超聲參數(shù)設(shè)置靈活，實(shí)驗(yàn)步驟標(biāo)準(zhǔn)化，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好，結(jié)果可靠性高。

細(xì)胞破碎的方法:

一、機(jī)械破碎法：是指利用搗碎機(jī)、研磨器或勻漿器 等將細(xì)胞破碎開(kāi)來(lái) 。

1. 高速組織搗碎：將材料配成稀糊狀液，放置于筒內(nèi)約1/3體積，蓋緊筒蓋，將調(diào)速器先撥至最慢處，開(kāi)動(dòng)開(kāi)關(guān)后，逐步加速至所需速度。此法適用于動(dòng)物內(nèi)臟組織、植物肉質(zhì)種子等。

2. 玻璃勻漿器勻漿：先將剪碎的組織置于管中，再套入研桿來(lái)回研磨，上下移動(dòng)，即可將細(xì)胞研碎，此法細(xì)胞破碎程度比高速組織搗碎機(jī)為高，適用于量少和動(dòng)物臟器組織。

二、物理破碎法：指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細(xì)胞破碎開(kāi)來(lái)。

1：用一定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液，使細(xì)胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動(dòng)力破碎細(xì)胞壁和細(xì)胞器）。

機(jī)制：可能與強(qiáng)聲波作用溶液時(shí)，氣泡產(chǎn)生、長(zhǎng)大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān)，空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細(xì)胞裂解。

超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時(shí)間、細(xì)胞濃度和細(xì)胞類(lèi)型等。（使用時(shí)注意降溫，防止過(guò)熱）。

2. 高壓破碎：細(xì)胞懸浮液從高壓室的環(huán)狀隙噴射到靜止的撞擊環(huán)上，被迫改變方向經(jīng)出口管流出。此過(guò)程中細(xì)胞經(jīng)歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化，從而破碎釋放內(nèi)含物。

這是一種溫和的、徹底破碎細(xì)胞的較理想的方法。

3. 反復(fù)凍融法：將細(xì)胞在-20度以下冰凍，室溫融解，反復(fù)幾次，由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度增高引起溶脹，使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎。

三、化學(xué)破碎法：指利用甲醛、丙酮等有機(jī)溶劑或表面活性劑作用于細(xì)胞膜，使細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)遭到破壞或透性發(fā)生改變 。

有些動(dòng)物細(xì)胞，例如腫瘤細(xì)胞可采用十二烷基磺酸鈉（SDS）、去氧膽酸鈉等細(xì)胞膜破壞。濃度一般為1mg/ml。

四、酶學(xué)破碎法 ：選用合適的酶，使細(xì)胞壁遭到破壞，進(jìn)而在低滲溶液中將原生質(zhì)體破碎開(kāi)來(lái)。

細(xì)菌細(xì)胞壁較厚，可采用溶菌酶處理效果更好。

裂解液標(biāo)準(zhǔn)配方: ：50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在這個(gè)pH范圍內(nèi)比較好發(fā)揮作用) 。

綜合敘述：無(wú)論用哪一種方法破碎組織細(xì)胞，都會(huì)使細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)或核酸水解酶釋放到溶液中，使大分子生物降解，導(dǎo)致天然物質(zhì)量的減少，加入二異丙基氟磷酸（DFP）可以抑制或減慢自溶作用；加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性，加入苯甲磺酰氟化物（PMSF）也能清除蛋白水解酶活力，但不是全部，而且應(yīng)該在破碎的同時(shí)多加幾次；另外，還可通過(guò)選擇pH、溫度或離子強(qiáng)度等，使這些條件都要適合于目的物質(zhì)的提取。

使用前注意事項(xiàng)：

1．根據(jù)所處理的樣本體積選擇適當(dāng)探頭，使用前后均須用酒精棉球擦洗探頭，換探頭須剛專(zhuān)用扳手更換；

2．AMPLITUDE旋鈕打開(kāi)時(shí)，探頭不得在空氣中暴露，特殊情況下(測(cè)試探頭)不應(yīng)超過(guò)10秒；

3．使用前準(zhǔn)備好冰盒，樣品處理時(shí)必須置于冰浴中，樣品濃度不可過(guò)大。